O que é endotoxina
É um componente especial da parede celular de bactérias gram-negativas- lipopolissacarídeo (LPS), que é liberado em grandes quantidades após morte bacteriana e desintegração. Quando há uma quantidade suficiente no corpo, pode ocorrer uma série de sintomas, por exemplo, febre, perturbação da microcirculação, choque de endotoxina e coagulação intravascular disseminada, falha de múltiplos órgãos e, às vezes, morte [1] .
Em experimentos de pesquisa científica, a endotoxina também é um fator a não ser ignorado.
A endotoxina tem efeitos diferentes em células diferentes, principalmente nos dois aspectos a seguir: (1) células transformadoras. Por exemplo, pode transformar as células hepáticas e enfraquecer a capacidade de absorção de hexose IR; (2) promover ou inibir a proliferação celular nos processos de proliferação e cultura celular .
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Como os produtos da Nest ajudarão?
Os produtos de ninho das soluções de cultura de células e bioprocessamento são produzidos e embalados nas salas limpas da classe 10.000 e da classe 100.000, durante as quais o indicador de endotoxina é monitorado. Os produtos serão testados pelo método do teste de endotoxina limulos após esterilizados pelo feixe de elétrons para controlar estritamente o índice de endotoxina, garantindo ao produto um vaso de cultura celular perfeito.
Além da endotoxina, a nuclease também é um perigo oculto durante a cultura de células em experimentos científicos.
Teste de pirogênio de coelho (RT) Método imunossorvente ligado a enzimas (ELISA)
O que é nuclease?
As nucleases são todas enzimas que podem hidrolisar e destruir os ácidos nucleicos e abundam em animais e plantas. De acordo com os diferentes substratos, ele pode ser dividido em duas categorias: DNAase (DNase) e RNase (RNase).
Efeitos negativos nas células corporais
Geralmente, as nucleases cumprem importantes funções fisiológicas in vivo. Se afetado por vários fatores desfavoráveis in vivo ou in vitro, o esqueleto de fita dupla do DNA intracelular se tornará instável, e as ligações fosfodiestres conectadas serão hidrolisadas por nucleases, resultando em quebra e danos na cadeia de DNA. A quebra do DNA pode reter o alongamento da fita ou causar alterações na estrutura da cromatina durante o processo de síntese de RNA, causando a transcrição anormal; e a degradação anormal do mRNA pela RNase afetará os níveis de expressão de proteínas. Tudo isso levará a mudanças na quantidade e qualidade do produto expresso, o que afetará a função celular em graus variados e até levará à morte celular.
Estudos demonstraram que a DNase1 pode agravar a necrose de hepatócitos induzida por acetaminofeno em camundongos [2] . Outros manifestam que a DNase medeia o colapso da cromatina durante a apoptose dependente da proteinase da aspartato de aspartato e está envolvida na formação da morfologia nuclear apoptótica [3] .
Como os produtos da Nest ajudarão?
Os produtos da Nest são produzidos e embalados nas salas limpas da classe 10.000 e da classe 100.000 e estão sujeitos a testes de qPCR para verificar o status livre de nuclease dos produtos. Os consumíveis de cálculos e bioprocessamento sem nuclease e bioprocessamento podem reduzir fatores prejudiciais e prejudicar os riscos no ambiente de cultura celular e ajudar a manter suas características e funções biológicas normais, facilitando assim a pesquisa experimental celular. Além disso, os produtos de detecção de molécula de ácido nucleico são aplicados na detecção qualitativa e quantitativa do ácido nucleico na amostra , onde as substâncias que danificam o ácido nucleico devem existir. Tranquilizadoramente, os consumíveis de PCR de ninho estão livres de contaminação por nuclease , resultados de detecção de ácido nucleico e precisas e confiáveis.
